Скачать статью в PDF формате
English version
УДК 619:615.015.4
ФАРМАКОТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ПРАЗИФЕНА
И.Р. САЛГИРИЕВ
cоискатель
М.Б МУСАЕВ
доктор ветеринарных наук
Всероссийский научно-исследовательский институт гельминтологии им. К.И. Скрябина,
117218, г. Москва, ул. Б.Черемушкинская, 28, e-mail: vigis@ncport.ru
Изучены фармакотоксикологические свойства комплексного антигельминтика празифена в форме пасты с содержанием фенбендазола и празиквантела. Установлена ЛД50 празифена, равная 7500 мг/кг. Празифен не оказал отрицательного воздействия на неповреждѐнную кожу крыс. Препарат обладает слабовыраженной кумуляцией.
Ключевые слова: лошади, празифен, паста, токсичность.
Практика показывает, что лошади часто инвазированы параскаридами, альфортиями, делафондиями, стронгилюсами, трихонематидами, оксиурисами, Anoplocephala magna, A. perfoliata, Paranoplocefala mamillana. Нередко встречается смешанная инвазия, чем усугубляется заболевание [3–5].
В связи проблемой профилактики и лечения лошадей болезнями, вызванными гельминтозами, в 2007 г. в ВИГИСе разработана рецептура антигельминтной пасты против основных гельминтозов лошадей – празифен®, содержащая в качестве действующих веществ две субстанции – фенбендазол и празиквантел, значительно расширяющие спектр антигельминтного действия. Установлена терапевтическая доза празифена при цестодозах и нематодозах лошадей, равная 1,0/10,0 мг/кг соответственно по ДВ празиквантелу и фенбендазолу [9, 11]. Празифен в терапевтической дозе проявил высокую эффективность при основных гельминтозах лошадей [10].
Целью нашей работы было изучение острой токсичности и кумулятивных свойств празифена, которые необходимы для внедрения его в ветеринарную практику.
Материалы и методы
Острую токсичность празифена изучали по Методическим рекомендациям Министерства здравоохранения РФ [8]. Опыты проводили на 30 белых крысах-самцах массой тела 180–220 г и 60 белых мышах-самцах массой 18–22 г.
Пасту празифена вводили белым крысам и мышам однократно в желудок с помощью специального зонда. На каждую дозу было использовано по 10 мышей и 6 крыс. В течение 14 сут за животными проводили наблюдения, при этом учитывали общее состояние, прием корма и воды, состояние шерстного покрова, поведение и активность животных. Для расчѐта средней смертельной дозы использовали метод пробит-анализа Личфильда и Уилкоксона [2].
Параметры острой накожной токсичности определяли на 12 белых крысах-самцах массой 250–300 г. Животных разделили на 2 группы (подопытная и контрольная). Перед нанесением препарата животным выстригали участок размером 2 х 4 см в области холки вогнутыми ножницами, так чтобы крысы не смогли слизывать препарат.
Подопытным животным пасту празифена наносили в дозе 7500 мг/кг по препарату. После нанесения пасты празифена на кожу животных рассаживали в отдельные клетки на сутки, чтобы избежать потери препарата.
Проявление симптомов интоксикации оценивали в течение двух недель.
Учитывали прием корма, воды и общее состояние животных.
Раздражающее действие празифена на кожу в дозе 7500 мг/кг определяли одновременно по установлению параметров накожной токсичности.
Первичную реакцию кожи оценивали сразу после нанесения препарата, далее через 1, 2, 24, 48 и 72 ч. Наблюдали за возможным покраснением, проявлением отѐка и его интенсивности, эритремы, язв и трещин и т. д. согласно «Методическим указаниям к постановке исследований по изучению раздражающих свойств и обоснованию предельно допустимых концентраций избирательно действующих раздражающих веществ в воздухе рабочей зоны» (1980).
Кумулятивные свойства празифена изучали методом Кагана, Станкевича [6] на 30 белых крысах-самцах массой 180–200 г, которых разделили на подопытную (п = 20) и контрольную (п = 10) группы. Пасту празифена вводили крысам подопытной группы с помощью желудочного зонда ежедневно в нарастающих дозах ¼ и ½ от ЛД50 (7500 мг/кг по массе препарата), до того момента, когда в живых останется 50 % животных. Контрольным животным вводили дистиллированную воду, равную по объѐму препарата. До и после введения препарата проводили наблюдения за животными, обращая внимание на их внешний вид: опрятность, гладкость и блеск волосяного покрова; состояние и поведение. Животных каждый день взвешивали, учитывали количество погибших. Подсчитывали среднюю смертельную и хроническую дозу исходя из суммирования дробных доз. Кумулятивные свойства препарата определяли на основании количественного показателя – коэффициента кумуляции, который рассчитывали по формуле:
ЛД50 (хроническая) К кум = --------------------------
ЛД50 (острая)
(т. е. это отношение суммарной дозы вещества, вызывающей гибель 50 % животных, к дозе, вызывающей 50 % гибели животных при однократном введении).
Результаты и обсуждение
При установлении параметров острой токсичности празифен вводили в желудок животным двух видов: белым мышам и белым крысам в диапазоне доз 5000–7500 мг/кг. Введение препарата в этих дозах не приводило к изменению поведения и общего состояния подопытных животных. Они сохраняли обычную двигательную активность, охотно потребляли корм и воду.
При пероральном введении празифена белым мышам и крысам не удалось установить параметры острой токсичности, так как подопытные животные не погибали даже от дозы 7500 мг/кг по массе препарата (ДВ 187,5/1875 мг/кг соответственно по празиквантелу и фенбендазолу). В большей дозе ввести празифен не было возможным из-за большого объѐма препарата. В связи с этим, в качестве ЛД50 условно приняли дозу празифена, равную 7500 мг/кг по массе препарата, а по действующим веществам 187,5/1875 мг/кг соответственно по празиквантелу и фенбендазолу.
На основании полученных данных можно сделать вывод о безопасности препарата.
Согласно полученным данным дозу 7500 мг/кг для белых мышей и крыс можно считать максимально переносимой. Празифен относится к IV классу малоопасных веществ по степени воздействия на организм при введении в желудок [7].
По результатам острой накожной токсичности доза 7500 мг/кг была максимально возможной для нанесения на неповрежденную кожу крыс, следовательно, празифен относится к IV классу малоопасных веществ (табл.1).
1. Влияние празифена на кожу крыс
|
Критерий оценки раздражающего действия |
Наличие или отсутствие (+ /–) |
|
Эритрема |
– |
|
Увеличение кожной складки |
– |
|
Трещины, изъязвления и т.д. |
– |
Празифен не оказал отрицательного воздействия на неповреждѐнную кожу крыс. Через две недели после нанесения пасты празифена выстриженный участок в области холки полностью покрылся здоровым шерстным по- кровом.
Часто химические соединения обладают низкой токсичностью, а при многократном введении животным в малых дозах могут накапливаться в организме и затем оказывать неблагоприятные воздействия. Суммарная пороговая доза празифена составила 83760 мг/кг по массе препарата. 50%-ную гибель животных наблюдали через 34 сут после начала дачи препарата (табл. 2).
2. Кумулятивные свойства празифена
|
Число животных в группе |
Доза препарата |
Дни дачи препарата до гибели 50 % животных |
Суммарная доза празифена, вве- денная живот- ным до 50%-ной гибели, мг/кг |
|
|
от ЛД50 |
по массе, мг/кг |
|||
|
20 |
¼ |
1850 |
12 |
22200 |
|
19 |
¼ |
1850 |
7 |
12950 |
|
17 |
¼ |
1850 |
6 |
11110 |
|
16 |
½ |
3750 |
4 |
15000 |
|
14 |
½ |
3750 |
4 |
15000 |
|
12 |
½ |
3750 |
2 |
7500 |
|
Итого |
|
|
34 |
83760 |
К кум = 11,17 по массе.
Таким образом, по принятой классификации химических веществ [7] празифен относится к группе веществ, обладающих слабовыраженной кумуляцией, т. к. коэффициент кумуляции равен 11,17/10,85 по празиквантелу и фенбендазолу.
Литература
1. Айтуганов Б.Е. Эпизоотология и усовершенствование терапии нематодозов лошадей при табунном содержании в условиях Западного Казахстана: Дис. … канд. вет. наук. – М., 2007. – 179 с.
2. Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. – Л.: Медгиз, 1963. – 152 с.
3. Большакова В.А. Нематодозы пищеварительного канала лошадей Республики Саха (Якутия) и усовершенствование мер борьбы с ними: Автореф. дис. … канд. вет. наук. – М.,1994. – 25 с.
4. Бундина Л.А. Пробстмариоз лошадей в Европейской части России: Автореф. дис. … канд. вет. наук. – М., 1994. – 24 с.
5. Двойнос Г.М. Стронгилиды (Nematoda: Stronygidae) домашних и диких лошадей: Автореф. дис. … д-ра биол. наук. – Киев, 1993. – 39 с.
6. Каган Ю.С., Станкевич В.В. Актуальные вопросы гигиены труда, промышленной токсикологии в нефтяной и нефтехимической промышленности. – Уфа, 1984. – С. 48–49.
7. Медведь Л.И., Каган Ю.С., Спыну Е.И. Пестициды и проблемы здравоохранения // Вестник Всес. хим. о-ва им. Менделеева. – 1968, Вып. 13, № 3. –С. 263–271.
8. Методические рекомендации по доклиническому изучению репродуктивной токсичности фармакологических средств, одобренные фармакологическим комитетом Минздрава России (протокол № 8 от 3 июля 1997) и утвержденные Минздравом России 18 декабря 1997.
9. Мусаев М.Б., Шумакович И.Е., Архипов И.А. Испытание празифена при основных гельминтозах лошадей // Рос. паразитол. журнал. – 2009. – № 2. – С. 105–108.
10. Мусаев М.Б., Шумакович И.Е., Архипов И.А. Эффективность празифена при основных гельминтозах лошадей // Матер. докл. науч. конф. Всерос. о-ва гельминтол. РАН «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». – М., 2010. – Вып. 11. – С. 299–302.
11. Мусаев М.Б., Берсанова Х.И., Джамалова А.З. и др. Комиссионное испытание празифена при основных гельминтозах лошадей // Матер. докл. науч. конф. Всерос. о-ва гельминтол. РАН «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». – М., 2011. – Вып.12. – С. 343–345.
© 2016 The Author(s). Published by All-Russian Scientific Research Institute of Fundamental and Applied Parasitology of Animals and Plants named after K.I. Skryabin.
This is an open access article under the Agreement of 02.07.2014 (Russian Science Citation Index (RSCI) and the Agreement of 12.06.2014 (CABI.org / Human Sciences section).