Фармакокинетика аверсектина С1 и празиквантела в плазме крови собак после однократного подкожного введения препарата авертель

Фармакология, токсикология

УДК 619:616.995.121
DOI:10.12737/13281
Поступила в редакцию 12.03.2015
Принята в печать  07.09.2015
Скачать статью в PDF формате
English version

    

ФАРМАКОКИНЕТИКА АВЕРСЕКТИНА С₁ И ПРАЗИКВАНТЕЛА В ПЛАЗМЕ КРОВИ СОБАК ПОСЛЕ ОДНОКРАТНОГО ПОДКОЖНОГО ВВЕДЕНИЯ ПРЕПАРАТА АВЕРТЕЛЬ

 

Ястреб В. Б. ¹, Новик Т. С. ^{1, 2}, Дриняев В. А. ^{1, 2}, Чукина С. И. ^{1, 2}, Авчук С. В. ², Тер–Симонян В. Г. ², Литвин А. А. ^3
1 Всероссийский научно-исследовательский институт фундаментальной и прикладной паразитологии животных и растений им. К. И. Скрябина, 117218, Москва, ул. Б. Черемушкинская,28, e-mail: yastreb@vniigis.ru
² OOO НБЦ «Фармбиомед»
³ Научно-исследовательский институт фармакологии им. В. В. Закусова

 

Реферат

Цель исследования – изучение фармакокинетики аверсектина С₁ и празиквантела в плазме крови собак после однократного применения авертеля.

Материалы и методы. Опыт проводили на 3 собаках, которым подкожно в области шеи вводили авертель в терапевтической дозе 0,5 мг/кг по аверсектину С₁ и 5 мг/кг по празиквантелу. Через 0; 0,5; 1; 2; 3; 6; 9; 12; 24; 36; 48 и 72 ч из вены предплечья отбирали кровь в пробирки с гепарином. Анализ проб плазмы крови собак на содержание аверсектина С₁ по сумме авермектинов В_1а и В_2а проводили методом жидкостной хроматографии высокого давления с флуоресцентным детектиро­ванием; чувствительность метода составляет 0,001 мг/л. Празиквантел определяли этим методом с ультрафиолетовым детектированием. Для расчетов фармакокинетических параметров применяли модельно-независимый метод с использованием программы «M-IND», позволяющей проводить первичную обработку данных «концентрация лекарственного вещества – время» и рассчитывать системные параметры лекарственного вещества методом статистических моментов.

Результаты и обсуждение. Аверсектин С₁ обнаруживали в плазме крови через 0,5 ч после введения авертеля. В последующее время концентрация его возрастала и на 24-й час отмечали максимальный уровень препарата, а затем его содержание снижалось. Аверсектин С₁ находили в крови собак и через 72 ч после введения авертеля. Празиквантел обнаружен через 0,5 ч после введения, а через 1 ч отмечали максимальную его концентрацию. Через 72 ч препарат не находили в крови собак. Максимальная концентрация аверсектина С₁ в плазме крови составила 13,4 нг/мл и выделяется он в 12 раз медленнее, чем празиквантел. Период полувыведения аверсектина С₁ составил 100,1 ч, а среднее пребывание в организме – 153,08 ч.

Ключевые слова: авертель; фармакокинетика, аверсектин С₁, празиквантел, собаки, жидкостная хроматография высокого давления.

 

Введение

В предыдущие годы нами разработан комплексный противопаразитарный препарат авертель на основе аверсектина С₁  и празиквантела. Препарат испытан при паразитозах собак и кошек и проявил высокую эффективность и хорошую переносимость в терапевтической и трехкратно повышенной дозах [1–4].

Авертель представляет собой инъекционный раствор широкого спектра действия для лечения паразитозов у собак и кошек. В качестве действующих веществ содержит аверсектин С₁ (в 1 мл 5 мг) и празиквантел (в 1 мл 50 мг).

Аверсектин С₁ представляет смесь авермектинов В₁, В₂, А₁ и А₂ в определенном соотношении.

Структурная формула празиквантела приведена ниже.

(RS)-2-(циклогексилкарбонил)-1,2,3,6,7,11b-гексагидро-4Н-пи­разино-[2,1-а]-изохинолин-4-он

 

Целью настоящих исследований было определение фармакокинетических параметров аверсектина С₁ (фракций В_1а и В_2а) и празиквантела после подкожного введения авертеля в плазме крови собак.

 

Материалы и методы

Исследования проводили на трех беспородных собаках массой 22–30 кг из приюта «Эко» (Москва). Содержание собак было групповым. Температура в помещении равнялась 20±2 ºС; влажность воздуха составляла 65±5 %; животных содержали при 9-часовом освещении. Собак кормили сухим кормом. Потребление воды не ограничивали. Собак не подвергали обработке другими лекарственными препаратами.

Собакам подкожно в области шеи однократно вводили авертель в терапевтической дозе из расчета 0,1 мл/кг массы тела (0,5 мг/кг по аверсектину С₁ и 5 мг/кг по празиквантелу).

Через 0; 0,5; 1; 2; 3; 6; 9; 12; 24; 36; 48 и 72 ч из вены предплечья отбирали кровь в пробирки с гепарином. Образцы крови центрифугировали при 3000 об/мин в течение 15 мин. Отделяли плазму крови и переносили в пластиковые пробирки; до анализа пробы плазму крови хранили при – 20 °С.

Анализ проб плазмы крови собак на содержание аверсектина С₁ по сумме авермектинов В_1а и В_2а проводили ранее разработанным методом жидкостной хроматографии высокого давления с флуоресцентным детектиро­ванием; чувствительность метода составляет 0,001 мг/л. Празиквантел определяли методом на основе ВЭЖХ с УФ-детектированием.

Для расчетов фармакокинетических параметров применяли модельно-независимый метод с использованием программы «M-IND», позволяющей проводить первичную обработку данных «концентрация лекарственного вещества – время» в биожидкостях при различных способах введения и рассчитывать системные параметры лекарственного вещества методом статистических моментов.

В основе модельно-независимого метода статистических моментов лежит оценка площади под концентрационной кривой лекарственного вещества в плазме крови – AUC (Area Under Curve), площади под кривой «произведение времени на концентрацию – время» – AUMC (Area Under Multiplication Curve).

Расчет фармакокинетических параметров начинается с определения наклона терминального (линейного в полулогарифмической системе координат) участка концентрационной кривой и программа вычисляет константу скорости элиминации (k_el) и отвечающий ей период полувыведения лекарственного вещества (t_1/2el).

Среднее время удержания препарата в плазме крови (MRT; mean residence time) вычисляют по формуле:

MRT = AUMC/AUC

Общий клиренс (CL), определяющий способность организма к элиминации ЛВ, вычисляют следующим образом:

 

Полученные экспериментальные данные предварительно были подвергнуты математической статистической обработке с помощью программы «Origin v.7.0» в соответствии с требованиями. В таблицах, где приведены концентрации аверсектина С₁ и празиквантела в плазме крови, приведены средние арифметические значения (), соответствующие им стандартные отклонения (SD), коэффициент вариации (C.V.%). В таблицах, где приведены фармакокинетические параметры, представлены те же статистические характеристики выборки.

  

Результаты и обсуждение

В таблице 1 приведены концентрации аверсектина С₁ в плазме крови собак после однократного подкожного введения авертеля в дозе 0,5 мг/кг, а на рисунке 1 – усредненный фармакокинетический профиль аверсектина С₁. Аверсектин С₁ обнаруживали уже через 0,5 ч после введения авертеля; в последующие периоды концентрация аверсектина С₁ постепенно возрастала. Через 24 ч отмечали максимальный уровень препарата; затем содержание аверсектина С₁ в плазме крови снижалось. Аверсектин С₁ находили в крови собак и через 72 ч после введения (рис. 1, 3).

Препарат авертель – комбинированный. Вторым его активным компонентом  является празиквантел. Празиквантел также был обнаружен через 0,5 ч после введения, причем в последующий срок исследований, т. е. спустя 1 ч отмечали максимальную концентрацию в плазме крови (табл. 2). Празиквантел выявляли в плазме крови экспериментальных животных на протяжении 48 ч наблюдений и через 72 ч препарат не был обнаружен в плазме крови собак (рис. 2, 4).

Однако для более точного представления о фармакокинетике аверсектина С₁ и празиквантела были рассчитаны фармакокинетические параметры обоих активных веществ в плазме крови собак после подкожного введения авертеля.

В таблицах 3 и 4 приведены результаты  фармакокинетического анализа аверсектина С₁ и празиквантела. Концентрации препарата определялись на протяжении 72 ч эксперимента. Максимальная концентрация аверсектина С₁ в плазме крови собак, в среднем, составила 13,42±0,62 нг/мл. При этом время ее наступления равнялось 24,0 ч (у всех собак в опыте). По сравнению с празиквантелом аверсектин С₁ в 12 раз медленнее выводится из организма животных. Так, период полувыведения аверсектина С₁ колебался от 69,25 до 156,99 ч (в среднем, 100,16±49,28 ч), а среднее время пребывания в организме составило 153,08±70,49 ч (109,13–234,38 ч). Аверсектин С₁ в значительно меньшей степени связывается с белками крови по сравнению с празиквантелом. Среднее значение кажущегося объема распределения составило 101,37±51,82 л/кг. Кажущийся объем распределения обычно не эквивалентен анатомическому объему, а отражает распределение препарата и степень его связывания в организме. Так, если препарат связывается преимущественно белками крови, то V_d будет меньше, чем действительный. С другой стороны, преимущественное связывание препарата во внесосудистом пространстве (как в нашем случае) приводит к превышению значения кажущегося объема распределения над реальным объемом. Исходя из того, что расчет V_d предполагает одинаковую концентрацию препарата по всему объему его распределения, величины V_d, превышающие общий объем жидкости, могут получаться в результате накопления в каком-либо участке тканей.

Из результатов таблицы 4 следует, что экстраполированная часть фармакокинетической кривой (AUC_t-), т. е. часть кривой от последнего определения концентрации до бесконечности в суммарную величину площади под фармакокинетической кривой (AUC_0-∞) значительного вклада не вносит. Эта величина, в среднем, составила 3,88±3,24 %. Поэтому все последующие расчеты проведены с учетом экстраполированной части.

Установлено, что празиквантел быстрее всасывается из места введения в системный кровоток животных по сравнению с аверсектином С₁, поскольку время наступления максимальной концентрации празиквантела (4,91±1,41 мкг/мл) для данной выборки животных при таком способе введения составило более 8 ч (в среднем, 8,33±6,35). Следует отметить, что у собаки № 2 наступление C_max зафиксировано через 1 ч после введения препарата.

Для празиквантела характерна медленная элиминация, т. к. период полувыведения, в среднем, составляет 7,99±2,08 ч. Параметр, характеризующий длительность пребывания лекарственного вещества в организме – MRT составил, в среднем, 14,96±2,17 ч. Учитывая подкожный путь введения авертеля, полученные данные позволяют отнести празиквантел к длительно живущим лекарственным ветеринарным средствам. Об этом косвенно свидетельствует средняя величина клиренса, равная 0,141±0,077 л/ч/кг. При этом средняя величина кажущегося объема распределения (V_d) – 1,78±1,44 л/кг говорит о том, что препарат распределяется во всех жидких средах организма и к его дозированию следует относиться с осторожностью, чтобы не вызвать его передозировки, обусловленной депонированием данного лекарственного вещества.

Таким образом, по величинам периода полувыведения и среднего времени удерживания в организме животных авертель относится к «долгоживущим» ветеринарным лекарственным средствам.

Таблица 1.

Таблица 1. Концентрации аверсектина С₁ в плазме крови собак после однократного подкожного введения
авертеля (доза аверсектина С₁ 0,5 мг/кг)

 

 

Таблица 2.

Таблица 2. Концентрации празиквантела в плазме крови собак после однократного подкожного введения
авертеля (доза празиквантела 5,0 мг/кг)

Рис. 1. Усредненный фармакокинетический профиль аверсектина С₁
в плазме крови собак после однократного подкожного введения
раствора авертеля в дозе 0,5 мг/кг (n = 3; )

 

Рис. 2. Усредненный фармакокинетический профиль празиквантела
в плазме крови собак после однократного подкожного введения
раствора авертеля в дозе 5,0 мг/кг (n = 3; )

Таблица 3.

 Таблица 3. Фармакокинетические параметры аверсектина С₁ в плазме крови собак
после однократного подкожного введения раствора авертеля (доза аверсектина С₁ 0,5 мг/кг)

Таблица 4.

Таблица 4. Фармакокинетические параметры празиквантела в плазме крови собак
после однократного подкожного введения раствора авертеля (доза празиквантела 5,0 мг/кг)

 

Литература

1. Новик Т. С., Ястреб В. Б., Чукина С. И. Переносимость препарата авертель в условиях субхронического опыта // Рос. паразитол. журнал. – 2015, № 2. - С. 104–112

2. Ястреб В. Б., Новик Т. С., Валиева Ж. М. Эффективность аверсекта плюс при цестодозах и нематодозах собак и кошек // Рос. паразитол. журнал. – 2012, № 3. – С. 121–124.

3. Ястреб В. Б. Эффективность аверсекта плюс против эктопаразитов у собак и кошек // Матер. докл. науч. конф. Всерос. о-ва гельминтол. РАН «Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями». – М., 2013. – С. 447–449.

4. Ястреб В. Б., Новик Т. С. Оценка противопаразитарной эффективности авертеля против эндо- и эктопаразитов у собак и кошек // Рос. паразитол. журнал. – 2014, № 4. – С. 105–113.


© 2015 The Author(s). Published by All-Russian Scientific Research Institute of Fundamental and Applied Parasitology of Animals and Plants named after K.I. Skryabin.
This is an open access article under the Agreement of 02.07.2014 (Russian Science Citation Index (RSCI) and the Agreement of 12.06.2014 (CABI.org / Human Sciences section).