Патоморфология печени, поджелудочной железы и двенадцатиперстной кишки золотистых хомяков при экспериментальном описторхозе.

Скачать статью в PDF формате
English version
Патогенез, патология и экономический ущерб
УДК 59:616.995.122-092.4

  ПАТОМОРФОЛОГИЯ ПЕЧЕНИ, ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ И ДВЕНАДЦАТИПЕРСТНОЙ КИШКИ ЗОЛОТИСТЫХ ХОМЯКОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ОПИСТОРХОЗЕ

Ключевые слова: патоморфология, эксперименталь- ный описторхоз, КВЧ-терапия, золотистый хомяк, печень, поджелудочная железа, двенадцатиперстная кишка.

В настоящее время эффективным методом, применяемым для лечения трематодозов, является терапия электромагнитным излучением крайне высо- кого частотного диапазона (КВЧ-терапия). К информационно-волновым ме- тодам лечения относится и ФРИ-терапия, представляющая электромагнитное излучение КВЧ-диапазона. Низко интенсивные электромагнитные и фоново- резонансные излучения воздействуют непосредственно на клеточные струк- туры и межклеточное вещество, усиливая процессы обмена и репарации. Улучшая кровоснабжение и питание тканей, эти излучения оказывают благо- творное опосредованное влияние на весь организм в целом при различных бо- лезнях, включая и описторхоз [1, 3, 4]. Безопасность и эффективность этого ме- тода доказана на большом экспериментальном и клиническом материале [2, 5].

Недостаточная изученность антигельминтного эффекта КВЧ-терапии в практике лечения гельминтозов, в том числе описторхоза, послужила основа- нием для микроморфологического исследования его воздействия на органы и ткани не только паразита, но и хозяина при экспериментальном описторхозе.

Цель нашей работы – изучение патоморфологии печени золотистых хомяков при экспериментальном описторхозе до и после применения КВЧ-терапии.

Материалы и методы

Золотистых хомяков разделили на три группы: 1) незараженные до лече- ния; 2) экспериментально зараженные до лечения; 3) экспериментально зараженные после КВЧ-терапии. Живую рыбу проверяли на зараженность мета- церкариями описторхид с помощью компрессория и светового микроскопа. Живых метацеркариев Opisthorchis felineus выделяли из зараженной рыбы семейства карповых и заражали ими золотистых хомяков. Доза заражения составляла 100 метацеркариев. С помощью пинцета и ножниц снимали под- кожную клетчатку и мышцы на глубине 2 мм со всей поверхности рыбы, из- мельчали ножницами в чашке Петри. Полученный материал массой по 50 г помещали в стакан с сетчатым дном реактора АВТЛ-6, заливали искусствен- ным желудочным соком в количестве 500 мл, мешалку фиксировали в рабо- чее состояние, включали аппарат в режим работы. После автоматического отключения через 25 мин и звукового сигнала проба отстаивалась в течение 10 мин; в заключение в смотровую кювету из сливного крана проводили от- бор осадочной жидкости объемом 1,5–2 мл, после чего отбирали по 100 вы- деленных метацеркариев, смешивали с 1 мл физраствора. Полученную взвесь выпаивали с помощью пипетки 18 хомякам. Через 21 сут проводили копро- овоскопическое исследование зараженных животных, для обнаружения яиц описторхид, оценки заражаемости и дальнейшего отбора в эксперимент. За- ражение проводили путем перорального введения живых метацеркариев. Эксперимент проводили на базе ВИГИСа под руководством д-ра вет. наук, проф. Р.Т. Сафиуллина. Органы от экспериментальных животных отобраны при вскрытии животных аспирантом С.К. Шибитовым и предоставлены для дальнейших гистологических исследований. Применяли схему лечения экс- периментального описторхоза золотистых хомяков исследуемой группы ап- паратом КВЧ-терапии «СЕМ ТЕСН», предоставленного к. т. н. А.М. Кожемя- киным (ООО»Спинор», г. Томск). Опыт проводили на базе Томского Госу- дарственного Университета. Микроморфологические исследования осу- ществляли на базе кафедры общей биологии с основами генетики и паразито- логии КемГМА. Парафиновые срезы окрашивали гематоксилином и эозином, галлоцианином и эозином, по Маллори, Селье. Гистохимические исследова- ния проведены с использованием Шик-реакции.  Микропрепараты изучали под световым микроскопом с микрофотосъемкой.

Результаты и обсуждение

При микроморфологическом исследовании в тканях печени инвазиро- ванных хомяков выявлены фокальные некрозы, увеличение двуядерных гепа- тоцитов в периферии дольки печени. В основной части печени установлена ацидофильная дистрофия печеночных клеток. Измененные гепатоциты были обособлены от окружающих клеток соединительнотканными волокнами. Фибротические изменения портальных трактов проявлялись расширением, их стенки были утолщены за счет разрастания соединительной ткани. От пор- тального тракта отмечали отхождение соединительнотканных волокон, обра- зующих тяжи, которые были инфильтрированы моноцитарными элементами в направлении к третьей ацинарной зоне. В сосудистой системе печени отме- чали изменения артерий и вен. В сосудах выявляли полнокровие и закупорку их эритроцитарной массой. В междольковых артериях эндотелиальные и гладкомышечные клетки гипертрофированы, в их просветах находили нейтрофилы, лимфоциты. Наблюдали отек стенок сосудов, разрыхление во- локон рыхлой волокнистой соединительной ткани, эозинофильную инфиль- трацию. В адвентициальной оболочке выявляли периваскулярный отек, ин- фильтрацию лимфоцитами, макрофагами и немногочисленными нейтрофи- лами. Междольковые вены полнокровны. Эндотелиальные клетки сосудов гипертрофированы, гиперхромны; подэндотелиальный слой разрыхлен. В некоторых участках стенки вен выявляли инфильтрацию лимфоцитов. Сину- соидные капилляры и пространства Диссе были расширены. Центральные вены увеличены в объеме, эндотелиальные клетки в них гипертрофированы;

отмечали их утолщение за счет увеличения волокнистых структур в подэндоте- лиальном слое. При проведении Шик-реакции обнаружено, что во второй и тре- тьей ацинарных зонах количество гликогена было незначительным. В первой ацинарной зоне гликоген обнаружить не удалось, что свидетельствует о том, что гельминт активно поглощает углеводы и в печени его запасы резко снижаются.

При экспериментальном описторхозе наблюдали пролиферацию эпите- лия желчных протоков печени в подлежащую соединительную ткань. В стен- ках протоков выражена инфильтрация лимфоцитами, макрофагами. В соеди- нительнотканной оболочке желчных протоков отмечали разрыхление, отек. В просвете желчных протоков обнаруживали яйца O. felineus, плазматические клетки, закупорку протоков желчными пигментами.

После применения КВЧ-терапии фокальные некротические изменения ткани печени выявлялись единично, реже встречались пикнотически изме- ненные печеночные клетки, двуядерные гепатоциты. Более выраженными были границы и форма гепатоцитов в первой ацинарной зоне; четко контури- ровались синусоиды между рядами гепатоцитов с хорошо выраженными ка- пиллярами, что указывало на усиленную циркуляцию крови в печени. Пор- тальные тракты были расширены, а фибротические изменения выражены слабо. Инфильтрацию моноцитарными элементами не наблюдали. В крупных артериях и венах выявляли полнокровие. Стенки сосудов были отечны, пол- нокровны, с умеренными фибротическими изменениями. Выявлены незначи- тельные пролиферативные изменения желчевыводящих протоков. Разраста- ния соединительной ткани выражены меньше, чем в контрольной группе. В просвете желчных протоков печени яиц O. felineus не обнаруживали. После проведения ШИК-реакции выявлено усиление окрашивания и увеличение количества мелких зерен гликогена в гепатоцитах всех зон печени.

Исследование поджелудочной железы показало, что при эксперимен- тальном описторхозе золотистых хомяков выявляли глубокие морфологиче- ские изменения со стороны всех структур железы. Пролиферация эпители- альных клеток очень часто сопровождалась образованием аденоматозных структур. Они локализовались в магистральных и крупных протоках вслед- ствие погружения покровного эпителия в подлежащий слой. В развитии склеротических изменений междолькового и внутридолькового пространства принимает участие периканаликулярная и частично – периваскулярная со- единительная ткань. Наиболее часто обнаруживали такие морфологические изменения, как каналикулит и периканаликулит. Наблюдаемые фибротиче- ские изменения железы обусловлены также интерстициальным воспалитель- ным процессом. В артериальной системе поджелудочной железы и окружа- ющих сосуды тканях отмечены дистрофические, склеротические и воспали- тельные изменения: разрушение волокон и мукоидный отек стенок мелких артерий, плазморрагия, периваскулярные инфильтраты, стаз и мелкоочаговые кровоизлияния в паренхиме железы. В единичных случаях выявляли мелкие поля некрозов с перифокальной воспалительной реакцией. Развитие проли- феративного каналикулита и периканаликулярного фиброза обусловлено общностью эмбрионального развития печени и поджелудочной железы, их иннервации, тесной функциональной сопряженностью и формированием па- тологических висцеро-висцеральных рефлексов, возникающих под влиянием паразитирования описторхисов в печени.

Морфологические изменения поджелудочной железы после терапии электромагнитным излучением КВЧ-диапазона были представлены: незначи- тельными фибротическими изменениями стромы, умеренно выраженным пе- риваскулярным отеком, единичными очагами фокального некроза, регенера- тивной пролиферацией эпителиоцитов.

При патоморфологическом исследовании двенадцатиперстной кишки при экспериментальном описторхозе золотистых хомяков отмечены резко

выраженные дистрофические изменения поверхностного эпителия. Призма- тические клетки эпителия имели уплощенный вид и вакуолизированную ци- топлазму. Наблюдали отек стромы, полнокровие и стаз в кровеносных сосу- дах, клеточную инфильтрацию поверхностных слоев слизистой оболочки, преимущественно лимфо- и плазмоцитарную. Ворсинки уплощены, крипты расширены, поверхностный эпителий и дуоденальные железы гиперплазиро- ваны. Гистохимически выявлено увеличение числа бокаловидных клеток; иногда отмечали метаплазию кишечного эпителия. Слизистая оболочка две- надцатиперстной кишки атрофирована, склерозирована.

После применения КВЧ-терапии наблюдали мало выраженный отек стромы. Уплощенные ворсины и призматические клетки их эпителия встре- чались редко, изменения со стороны крипт проявлялись слабо. Выражено полнокровие подслизистой основы, в которой находились разветвленные же- лезистые структуры.

Таким образом, КВЧ-терапия экспериментального описторхоза золоти- стых хомяков значительно уменьшает у них явления дистрофических про- цессов в печени, поджелудочной железе и двенадцатиперстной кишке и может расцениваться как один из дополнительных, щадящих для хозяина, эффективных современных методов лечения трематодоза.

Литература

1. Бецкий О.В., Лебедева Н.Н. Основные биофизические и физиологиче- ские механизмы биологических эффектов низкоинтенсивных миллиметровых волн // Докл. XIII Рос. симп. с междунар. уч. «Миллиметровые волны в меди- цине и биологии». – М.: ИРЭ РАН, 2003. – С. 134–137.

2. Поддубная О.А. Опыт комплексного лечения больных хроническим опи- сторхозом с включением фонового резонансного излучения // Вопр. курортоло- гии, физиотерапии и лечения. Физкультуры. – 2008. – № 1. – C. 50–51.

3. Поддубная О.А., Кожемякин А.М., Левицкий Е.Ф. и др. Комплексное ле- чение больных хроническим описторхозом (комплексное лечение с включением КВЧ-терапии) // Мед. технол. – утвержд. Росздравнадзором. – 2006. – 125 с.

4. Поддубная О.А., Островерхова Г.П., Левицкий Е.Ф. Безмедикаментозное лечение описторхоза // Мед. паразитол. и паразит. бол. – 2007. – № 2. – C. 40–42.

5.   Поддубная О.А., Левицкий Е.Ф., Кожемякин А.М. Эффективность КВЧ- терапии фоновым резонансным излучением в комплексной хронореабилитации больных хроническим холециститом в сочетании с хроническим описторхозом // Сиб. мед. журнал. – Томск, 2009. – Т. 24, № 3. – Вып. 2. – С. 49–53.

6. Gumucio J.J., Miller D.L. Liver cell heterogeneity // The liver: biology and patology. – New York, 1982. – P. 647–661.

7.     Jungermann K., Katz N. Functional hepatocellular heterogeneity // Hepathology. – 1982. – V. 2. – P. 385–395.

8. Rapppaport А.М. Physioanatomical basis of toxic liver injury. In: Toxic in- jury of the liver. – New York, 1979. – P. 1–58.

9.   Rappaport A. Physioanatomic considerations. In: Diseases of the liver. – Philadelphia, Toronto. Lippincot, 1982. – P. 1–58

© 2015 The Author(s). Published by All-Russian Scientific Research Institute of  Fundamental and Applied Parasitology of Animals and Plants named after K.I. Skryabin. 
This is an open access article under the Agreement of 02.07.2014 (Russian Science Citation Index (RSCI)) and the Agreemnt of 12/06/2014 (CABI org / Human Sciences section)