Влияние анаплазмоза на репродуктивную функцию овцематок.

ВЛИЯНИЕ АНАПЛАЗМОЗА НА РЕПРОДУКТИВНУЮ ФУНКЦИЮ ОВЦЕМАТОК

Ключевые слова: овцематки, клещи, анаплазмоз, ре- продуктивная способность. 

Анаплазмоз овец – кровепаразитарная трансмиссивная болезнь, вызыва- емая эндоглобулярным внутриэритроцитарным паразитом Anaplasma ovis Lestoguard, 1924. Основные признаки анаплазмоза – анемия, исхудание, поте- ря продуктивности и нарушение воспроизводительной функции животных. Анаплазмоз наносит овцеводству значительный экономический ущерб.

В Ставропольском крае основная эпизоотическая роль в распростране- нии анаплазмоза овец принадлежит клещу Dermacentor marginatus. Этот вид клеща развивается по треххозяинному типу. Весной, с первых дней выхода животных на пастбище, D. marginatus нападает на них в стадии имаго. Про- кормителями юных стадий клеща служат мелкие грызуны: мыши, суслики, хомяки и др. В июне–июле клещ не активен. В третьей декаде августа и до конца октября нападение на скот возобновляется. Именно осеннее нападение инвазированных клещей способствует заражению овцематок [2].

Целью наших исследований было изучение влияния анаплазмоза на ре- продуктивную функцию овец.

Материалы и методы

Исследования проводили на 12 овцах породы северокавказский меринос в возрасте двух лет (частный сектор, село Московское Изобильненского рай- она Ставропольского края). Животных подбирали в опыт по принципу анало- гов и исследовали на наличие анаплазм.

Всем подопытным животным на 1 и 11-е день сутки опыта вводили по 2 мл эстрофана с целью синхронизации охоты. Шесть подопытных животных на 1-е сутки заражали (40 мл) кровью от овец-носителей анаплазм. Шесть овец были контролем и заражению не подвергались. У всех животных прово- дили гематологические, иммунологические исследования и определяли уро- вень гормонов (эстрадиол, прогестерон).

Для постановки диагноза на анаплазмоз проводили микроскопию мазков периферической крови. Кровь брали из кончика  уха, фиксировали спирт эфиром и окрашивали по Романовскому–Гимза. Мазки крови просматривали по нижнему и верхнему краю. При обнаружении паразитов в мазках, опреде- ляли интенсивность инвазии путем подсчета их числа в 20 полях зрения и выражали в процентах к общему числу эритроцитов в этих полях зрения.

Гематологические исследования проводили по общепринятым методи- кам: количество гемоглобина определяли колориметрическим методом с ис- пользованием гемометра ГС-3, подсчет количества эритроцитов – с помощью счетной камеры Горяева. Исследования реакций иммунной системы организ- ма овец проводили по общепринятым методикам. Оценивая естественную резистентность организма, исследовали: бактерицидную активность сыво- ротки крови методом, основанным на изменении оптической плотности мясо- пептонного бульона при росте в нем кишечной палочки (Е. coli) с добавлени- ем и без добавления испытуемой сыворотки (Смирнова, Кузьмина, 1996); ли- зоцимную активность сыворотки крови – методом, основанным на изменении оптической плотности среды в результате способности лизоцима крови лизи- ровать тест-культуру Micrococus lisodeicticus в 0,5%-ном растворе поварен- ной соли. Оценку Т- и В-системы иммунитета проводили, используя микро- метод образования Е-розеток (Е-РОК) и ЕАС-розеток (ЕАС-РОК), описанный в «Методических рекомендациях по количественному определению и функ- циональной оценке Т- и В-лимфоцитов в периферической крови».

Уровень гормонов (эстрадиол, прогестерон), влияющих на воспроизводи- тельную функцию организма, определяли радиоиммунологическим анализом.

Результаты и обсуждение

При микроскопии мазков периферической крови опытных и контроль- ных животных анаплазм обнаружено не было. Все подопытные овцематки до заражения были свободны от анаплазм.

Через 2–3 сут после второго введения эстрофана (13–14 сут опыта) у всех контрольных и опытных овцематок отмечали клинические признаки течки. На 14-е сутки в мазках периферической крови подопытных животных стали обнаруживать единичные анаплазмы. Через 28 сут после заражения парази- темия достигла 10–14 %. В мазках крови отмечали анизоцитоз, пойкилоцитоз, полихромазию.

На 29–30-е сутки опыта у всех контрольных и двух опытных овцематок появились клинические признаки течки. Таким образом, продолжительность полового цикла составила 16–17 сут. У четырех из шести зараженных живот- ных течка отсутствовала. У подопытных животных отмечали снижение коли- чества гемоглобина (62,2±4,2 г/л) и эритроцитов (4,8±0,7х1012/л) (табл. 1). В контрольной группе животных установлено увеличение количества гемогло- бина и эритроцитов во время охоты по сравнению с анэстральным периодом. Количество лейкоцитов у подопытных животных на 21-е сутки увеличилось до 14,5±1,0 х109/л, на 29–30-е сутки опыта – до 16,7±0,6 х109/л.

В динамике количества Т - и В-лимфоцитов прослеживаются следующие закономерности (рис. 1). У опытных животных отмечали усиление клеточно- го иммунного ответа Т- лимфоцитов, начиная со второй недели после зара- жения (37,3±1,7). В пик паразитемии, который совпал с периодом эструса (29–30-е сутки опыта), количество Т-лимфоцитов достигло 58,3±5,1 %. До- стоверных изменений со стороны гуморального ответа В-лимфоцитов нами не отмечено.

При изучении естественной резистентности в группе подопытных жи- вотных показатель БАСК (табл. 2) возрастал через неделю после заражения. В последующие сутки наблюдения достоверных колебаний бактерицидной активности по сравнению с контролем не наблюдали. Лизоцимная активность достоверно снижалась на 29–30-е сутки после заражения и составила 16,9±1,9%, что ниже на  52,3 % по сравнению с контролем.

1. Гематологические показатели у контрольных и опытных овцематок при экспериментальном анаплазмозе

П р им е ч а н ие . Р ≤ 0,05.

Рис. 1. Динамика Т- и В-лимфоцитов в крови у контрольных и опытных овцематок

2. Показатели естественной резистентности контрольных и опытных овцематок при экспериментальном анаплазмозе

П р им е ч а н ие . Р ≤ 0,05.

В фолликулярную фазу полового цикла (29–30-е сутки опыта) у кон- трольных животных отмечали наименьшую концентрацию прогестерона (0,243–0,240 нг/мл) и наибольшую – эстрадиола (8,1–5,9 пг/мл), стимулиру- ющего течку (рис. 2). У четырех подопытных овцематок с признаками ане- мии и отсутствием течки секреция эстрадиола подавлялась в период острой стадии болезни (28-е сутки). Показатели прогестерона соответствовали фи- зиологической норме.

Рис. 2. Концентрация прогестерона и эстрадиола в крови контрольных и опытных овцематок с отсутствием течки

Через 32 сут опыта всех подопытных животных подвергли лечению ан- тибиотиком тетрациклинового ряда – Нитокс–200 и витаминами группы В – В6 и В12. Через одни сутки после введения антибиотика и первой инъекции витамина состояние овцематок улучшилось. У них отмечали снижение па- разитемии анаплазм, однако кровь восстанавливалась  медленно.

Таким образом, отсутствие течки установлено у четырех из шести зара- женных животных; отмечается снижение количества гемоглобина и эритро- цитов, подавляется секреция эстрадиола.

Литература

1. Даугалиева Э.Х., Филиппов В.В. Иммунный статус и пути его коррек- ции при гельминтозах сельскохозяйственных животных. – М.: Агропромиз- дат, 1991. –325 с.

2. Кошкина Н.А., Чвалун В.А., Колесников В.И., Мишенина Е.В. Влияние латентного анаплазмоза на показатели иммунитета овцематок // Вет. патол. – М., 2007. – №2 (21). – С. 59–63.

3. Кошкина Н.А. Течение экспериментального анаплазмоза у овцематок // Вестник ветеринарии. – Ставрополь, 2008. – № 1. – С. 40–44.

4. Теплова Е.И., Чвалун В.А., Кошкина Н.А, Мишенина Е.В. Хроническое течение анаплазмоза у племенных баранов при экспериментальном зараже- нии // Сб. науч. тр. ГНУ СНИИЖК. – Ставрополь, 2004. – С. 95–99.

© 2015 The Author(s). Published by All-Russian Scientific Research Institute of  Fundamental and Applied Parasitology of Animals and Plants named after K.I. Skryabin. 
This is an open access article under the Agreement of 02.07.2014 (Russian Science Citation Index (RSCI)) and the Agreemnt of 12/06/2014 (CABI org / Human Sciences section)